《海贼无双3》在前作基础上新增了多名可使用角色，虽然游戏中人物图鉴有64个位置，但实际可用角色的角色为37名，其他为援助角色，援助角色不可选择只在特定战场出现。下面是全部37名可用角色的解锁方法以及援助角色的登场战场。
可用角色一览
| 角色名 | 解锁条件 |
| 路飞 | 初始可用 |
| 索隆 | 故事模式：完成序章 |
| 娜美 | 故事模式：完成第2章2话 |
| 乌索普 | 故事模式：完成第1章2话 |
| 山治 | 故事模式：完成第1章3话 |
| 乔巴 | 故事模式：完成第2章话 |
| 罗宾 | 故事模式：完成第2章话 |
| 弗兰奇 | 故事模式：完成第3章3话 |
| 布鲁克 | 故事模式：完成第3章4话 |
| 革命军 | |
| 萨博 |
故事模式：完成最终章4章
首发特典解锁
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| 伊万科夫 | 初始可用 |
| 海军?CP9?世界政府 | |
| 藤虎 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 斯摩格 | 故事模式：完成第1章5话 |
| 达斯琪 | 初始可用 |
| 青雉 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 路奇 | 故事模式：完成第3章2话 |
| 黄猿 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 赤犬 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 卡普 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 麦哲伦 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 凯撒 | 故事模式：完成最终章3章 |
| 超新星 | |
| 罗 | 初始可用 |
| 王下七武海 | |
| 多弗拉明戈 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 米霍克 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 巴基 | 故事模式：完成第1章1话 |
| 克洛克达尔 | 故事模式：完成第4章2话 |
| 莫利亚 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 汉考克 | 故事模式：完成第4章4话 |
| 甚平 | 故事模式：完成第4章2话 |
| 熊 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 神 | |
| 艾尼路 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 白胡子海贼团 | |
| 艾斯 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 马尔科 | 故事模式：完成第4章3话 |
| 白胡子 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 四皇 | |
| 蒂奇 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 香克斯 | 梦之航海日志模式解锁 |
| 其他 | |
| 佩罗娜 | 故事模式：完成终章1话 |
